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重生之液相色谱反相柱

整理时间:2022-04-20   热度:67

新的色谱柱总是很贵,科研院所和规模较小的公司财大气粗的少有,给每一种方法配一根新的色谱柱只是一个美好的愿望。我相信大部分同学或者同行的实验室里总会有那么一批用过的色谱柱。当2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 需要开发新的方法时老板总会从抽屉或者其他角落里翻出一根陈年老柱,神秘兮兮的告诉你这根色谱柱的悠久历史,希望你能用这根柱子再创辉煌。这个时候相信很多同学心里已是万“马”奔腾。


不过,seriously,色谱柱值不值得再生,究竟该如何再生,却一直是一个江湖传说。笔者今日也遇上这种问题,也深入的做了一些调查。发现事情不是那么简单。总的来说,2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 首先要考虑的是值不值得在一根老柱子上浪费时间,当然,对于那些老板抱着死马当活马医的心思的同学,这个是不适用的,反正,作为一个行业小白,2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 的时间在老板眼里就是用来浪费的。


一般来说,对于C18柱子其寿命大概在2000次左右,不过根据实际情况,可能会上下浮动不少。如果旧柱子的使用次数跟预期寿命相差不大,就没必要浪费时间在上面了,一方面是投入产出比太低,另一方面对于一个全新的方法开发来说,旧柱子会有各种各样的问题,比如基线不稳,各种鬼峰,分辨率太低等。还不如说服老板买一根新的柱子。


对于科研人员来说,有时候2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 进几百次样就可以完成一个项目,如果这根柱子就此被抛弃,还是觉得挺可惜的。大部分老板会暂时把它打入冷宫,等待在对的时间遇见对的你。对于这种柱子,花点时间在上面还是很有价值的。还有一些柱子是由于使用不当造成性能下降,我很也会考虑用一些方法让它重生。


柱子长时间不用或者操作不当会导致一些问题,比如,固定相彻底变干燥,柱子入口筛板被颗粒物堵塞,固定相表面键合官能团流失,难溶解物质在柱子里的堆积等。针对不同的问题,2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 有不同的解决方法。比如保护液蒸发,固定相彻底变干,这并不是很可怕的事情。用有机相慢慢冲洗就可以恢复。


柱子进口筛板堵塞的问题可以通过反冲解决。在日常使用中也要注意预防这个问题,通过保护柱和样品过滤可以将绝大多数颗粒物移除。


固定相表面键合的官能团会随着使用时间的增长而缓慢流失,这也是为什么柱子使用一段时间之后柱效会下降。这是正常的,无须担心。需要2022世界杯竞猜下注官网(中国)有限公司 注意的是一些极端条件会加速这个过程,比如流动相的pH超出柱子的耐受范围。如果出现非正常的流失现象,柱子基本上无法修复。


对于沉积在柱子中的难溶解物质,还是可以通过一定的程序洗脱的。柱子的再生,也往往是指这个过程。对于大多数的问题,可以依次用乙腈或者甲醇,二氯甲烷,然后回到乙腈或者甲醇,最后用流动相反向冲洗柱子。冲洗的溶剂种类,时间长短和顺序可以根据实际情况调整,以下是一个实际例子:

100% 甲醇

100% 乙腈

75%乙腈+25%异丙醇

100%异丙醇

100%二氯甲烷

100%正己烷

100%异丙醇


来源:分析化学

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